ADH pradinio reakcijos greičio priklausomybės

Darbo tikslai: 1. Nustatyti vo priklausomybę nuo fermento kiekio 2. Ištirti vo priklausomybę nuo substrato (etanolio) koncentracijos 3. Apskaičiuoti ADH kinetinius parametrus (KM, Vmax) 4. Apskaičiuoti ADH savitąjį aktyvumą.

Darbo eiga/rezultatai: 1. Į kiuvetę įpylėme 2,8 ml 0,050 M Tris/HCl buferinio tirpalo (pH 8,5), 0,1 ml 3 M etanolio ir 0,1 ml NAD+ tirpalo. 2. Atitinkamai į 4 kiuvetes pylėme 5, 10, 15 ir 20 µL ADH tirpalo. Matavome optinį tankį, pasitelkiant spektrofotometrą, esant bangos ilgiui 340 nm. 3. Bandymą kartojome su 10 µL ADH tirpalo, tačiau keitėme etanolio kiekį atitinkamai 10, 20, 40, 60, 80, 100 µL. 4. Braižėme priklausomybių grafikus. 5. Įvertinome ADH reakcijos kinetinius parametrus (KM, Vmax). 6. Apskaičiavome ADH savitąjį aktyvumą.