Gliadino nustatymas ELISA metodu

ELIZA - metodas pagrįstas antikūnų gebėjimu sąveikauti su konkrečiu antigenu, šis metodas naudojamas daugiau nei 55 metus. Šiandieną tai dažniausiai naudojama technika stebėjimui ir analizei. Iš pradžių antigeno ir antikūno sąveika buvo stebima naudojant radioaktyviąsias medžiagas, tačiau greitai toks metodas buvo pakeistas lengviau perskaitomomis ir saugesnėmis fermentinėmis sistemomis, pavyzdžiui, peroksidazė dažniausiai naudojamas fermentas.

Nepaisant visų privalumų, ELISA jautrumas tam tikroms sistemoms yra ribotas, todėl sukuriami nauji metodai, kurie galėtų pagerinti ELISA aptikimo ribą. Ištirti kai kurie variantai, skirti jautrumui didinti, pavyzdžiui, redokso kompleksai, elektroaktyvios molekulės ir metalo jonai. Taip pat buvo naudojama keletas nanotechnologijomis pagrįstų metodų. Nanodalelės gali tarnauti kaip puikus nešiklis specifinėms atpažinimo biomolekulėms, tokioms kaip antikūnai. Dėl didelio paviršiaus ir tūrio santykio, jie suteikia daug vietos užfiksuoti elementui.

Aukso nanodalelės pateikia unikalias chemines ir fizikines savybes bei biologinį suderinamumą. Pranašumas aukso nanodalelių: lengva sintezė ir efektyvus paviršiaus modifikavimas derinant su biomolekulėmis.

Svarbus žingsnis gaunant aukso kompleksus yra biomolekulių sujungimas su aukso nanodalelėmis.  Keli parametrai tokie kaip paviršiaus chemija, pH, stabilizavimo agentai, priedų įdėjimo tvarka stipriai įtakoja galutinį biomolekulių dydį ir veiksmingumą. AuND - biomolekulių surišimas galimas skirtingomis procedūromis. Biomolekulės gali būti tiesiogiai adsorbuotos ant nanodalelių paviršiaus elektrostatinėmis ar hidrofobinėmis sąveikomis, bus didelis baltymų dalelių skaičius ir atsitiktinė biomolekulės orientacija. Kovalentine imobilizacija galima geriau kontroliuoti dalelių dydį ir sujungimo orientaciją. Kiekviena iš aprašytų procedūrų turi privalumų ir trūkumų, tokių kaip nekovalentiškai pritvirtintų biomolekulių praradimas arba biomolekulių aktyvumo praradimas dėl agresyvių sąlygų. Taigi, optimalus sujungimo metodas priklauso nuo galutinio taikymo.