Žmogaus kraujo krešėjimo faktoriaus VII transgeno išskyrimas panaudojant žuvų embrionus ir specialiai infekuotas ląsteles

Žmogaus rekombinantis aktyvintas krešėjimo faktorius VII yra labai galingas vaistas. Vartojamas įgimtiems hemostazės sutrikimams gydyti, tokiems kaip: įgimtas faktoriaus VII trūkumas, A ir B hemofilijų inhibitorinė forma, įgyta hemofilija ir kt. Tyrimų duomenimis, 1 iš 500 000 žmonių serga kraujo krešėjimo sutrikimais, dėl kurių yra sutrikęs kraujo krešumas. Krešėjimo faktorius VII tai plazmoje esantis 406 aminorūgščių baltymas, sintezuojamas kepenų hepatocituose ir išskiriamas į kraują kaip polipeptidas, sudarytas iš vienos grandinės, aktyvuojamas į antrą grandinę žmogaus krešėjimo faktoriaus VIIa, esant trombinui ir faktoriui Xa. Šiai biosintezei yra būtinas vitaminas K.(1) Ši aktyvacija atliekama skylinant vidinei peptido jungčiai, esančiai ties argininu -152 ir izoleucinu - 153, siekiant gauti grandinę, turinčią 10 anglies karboksiglutamo rūgšties liekanas.[1]

Problema- Kraujavimo ir hemostazės problemos sergant A arba B hemofilija gali būti išsprendžiamos naudojant faktorių VIII ir IX preparatus, išgautus iš plazmos rekombinantinės DNR technologija. Yra antikūnų neutralizuojančių šiuos faktorius, dėl kurių kraujo krešėjimo sutrikimų gydymas pacientams sunkus, dėl šios priežasties yra svarbu atrasti naujas gydymo strategijas.Visi šie esami terapiniai apribojimai paskatino rekombinantinio VII faktoriaus vystymąsi kaip galimą pacientų, sergančių hemofilija gydymą. Kaip alternatyva pacientams, kurių kraujas gamina antikūnius prieš krešėjimo faktorius, gali būti panaudojamas rekombinantinis krešėjimo faktorius VII. VII faktorius, gla-proteinas, kurio biosintezei reikia vitamino K, yra svarbiausias krešėjimo pradžios faktorius.[2]

Tyrimų tikslas- Išskirti ir išgryninti tinkamą sergančių hemofiliją žmonių gydymui krešėjimo faktorių VII, panaudojant žuvų embrionus bei užkrėstas ląsteles.

[1] MASROORI, Nasser, et al. High-level expression of functional recombinant human coagulation factor VII in insect cells. Biotechnology letters, 2010, 32.6: 803-809.

[2] HWANG, Gyulin, et al. Fish as bioreactors: transgene expression of human coagulation factor VII in fish embryos. Marine Biotechnology, 2004, 6.5: 485-492.