Tirpaus rekombinantinio žmogaus augimo hormono išskyrimas iš trasngeninių augalų bei E.Coli ekspresijos sistemų

Žmogaus augimo hormonas (hGH), dar vadinamas somatotropinu. Tai vienos grandies 22kD polipeptidas, sudarytas iš 191 aminorūgšties liekanų. Šis baltymas gaminamas hipofizėje, vadinamojoje posmegeninėje liaukoje. hGH struktūrą stabilizuoja 2 disulfidiniai tilteliai, sudarantys didelę (Cys53 - Cys165) ir mažą (Cys182-Cys189) kilpas.1 Žmogaus augimo hormonas stimuliuoja ląstelių augimą, jų reprodukciją bei regeneraciją. hGH labai svarbus žmogaus vystymuisi. Rekombinantinis hGH (22kD izomeras) vartojamas kaip vaistas skirtas vaikų augimo sutrikimams gydyti bei suaugusiems, kuomet yra žmogaus augimo hormono trūkumas. 2

Problema: ekspresuojami žmogaus augimo hormonai yra linkę sudaryti netirpius agregatus. Dėl šios priežasties ilgėja išgryninimo trukmė, mažėja baltymų ekspresijos kiekis, didėja produkto kaina.

Tikslas: pagaminti tirpų žmogaus augimo hormoną naudojant skirtingas ekspresijos sistemas – transgeninį augalą bei E.coli bakteriją .

1 Levarski, Z., Šoltýsová, A., Krahulec, J., Stuchlík, S., & Turňa, J. High-level expression and purification of recombinant human growth hormone produced in soluble form in Escherichia coli. Protein expression and purification(2014), 100, 40-47.

2 Cunha, N. B., Murad, A. M., Cipriano, T. M., Araújo, A. C. G., Aragão, F. J., Leite, A., & Rech, E. L. Expression of functional recombinant human growth hormone in transgenic soybean seeds. Transgenic research, (2011). 20(4), 811-826.